電熱培養箱的保養方法以及其特點(diǎn)

 

　　1、顯微鏡：倒置式顯微鏡是細胞培養實(shí)驗室日常工作常規*設備，主要用于日常了解細胞的生長(cháng)情況并觀(guān)察有無(wú)污染發(fā)生。如資金允許，建議選用配置有照相系統的高品質(zhì)相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統或縮時(shí)電影拍攝裝置等，可隨時(shí)拍攝并記錄細胞生長(cháng)情況。

 

　　超凈工作臺：目前絕大部分細胞實(shí)驗室使用超凈工作臺實(shí)現無(wú)菌操作，具有操作簡(jiǎn)單、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好。超凈工作臺主要有兩種——側流式（垂直式）和外流式（水平層流式）。工作原理一般是將室內空氣經(jīng)粗過(guò)濾器初濾，由離心風(fēng)機壓入靜壓箱，再經(jīng)空氣過(guò)濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過(guò)無(wú)菌區，從而形成無(wú)塵無(wú)菌的高潔凈度工作環(huán)境。

 

　　2、（1）側流式工作臺：空氣凈化后的氣流由左或右側通過(guò)工作臺面流向對側，也有從上向下或從下向上流向對側，形成氣流屏障保持工作區無(wú)菌，工作臺結構為封閉式；

 

　?。?）外流式工作臺：凈化后的空氣面向操作者流動(dòng)，因而外方氣流不致混入操作，工作臺結構為開(kāi)放式，但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗操作對操作者不利。超凈工作臺應需要定期請有關(guān)部門(mén)檢查潔凈度，符合要求的超凈工作臺其潔凈度應達到100級，用塵埃粒子計數儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數量不應超過(guò)3.5個(gè)/L；空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s；細菌菌落數平均<1個(gè)，根據無(wú)菌狀況必要時(shí)需要置換過(guò)濾器。

 

　　3、培養箱：體外培養的細胞和體內細胞一樣，需要在恒定的溫度下生存，一般適生長(cháng)溫度為37℃，溫差變化不應超過(guò)±0.5℃。溫度升高2℃時(shí)，變不利于細胞生存，溫度達到40℃以上細胞將很快死亡。因此，可控溫的恒溫培養箱、CO2培養箱是選擇。

 

　?。?）恒溫培養箱：應選隔水式或晶體管式自控溫培養箱，此類(lèi)培養箱靈敏度高，溫度控制較穩定。一般的恒溫培養箱價(jià)格較便宜，其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養。

 

　?。?）CO2培養箱：目前多數的細胞培養室已廣泛使用。CO2培養箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細胞培養時(shí)所需要的一定量的CO2（常用濃度為5％），易于穩定培養液pH，適用于開(kāi)放或半開(kāi)放培養。使用培養瓶時(shí)，為使培養瓶?jì)扰c外界保持通氣狀態(tài)，可將瓶蓋略微旋松，為避免細胞被污染，使用這種培養方式時(shí)，培養箱內空氣必須保持清潔，需定期用紫外線(xiàn)照射或酒精消毒，同時(shí)培養箱內應放置盛有無(wú)菌蒸餾水的水槽，防止培養液蒸發(fā)，保持箱內相對濕度在100%。

 

　?。?）細胞培養耗材：培養細胞的器皿可用培養皿、培養板或培養瓶，萊貝在本篇不做詳細介紹，這部分知識會(huì )在實(shí)驗室耗材知識部分作重點(diǎn)介紹。

 

　　4、烘箱（干燥箱）：電熱培養箱用于細胞培養的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí)，烘箱內溫度一般要達到160℃以上，通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始，至100℃時(shí)，停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細胞的生長(cháng)。消毒后不能立即打開(kāi)箱門(mén)，以免驟冷導致玻璃器皿破裂，應等溫度自然下降至100℃以下后可開(kāi)門(mén)。

 

　　5、水純化裝置：細胞培養對水的質(zhì)量要求較高，細胞培養、細胞培養相關(guān)液體的配制用水以及清洗細胞培養器皿用水都必須事先經(jīng)過(guò)嚴格的純化處理。目前有多種純化方法相結合，可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便，可掛壁式、臺式、可配儲水箱、也可直接用分液槍、還可根據各類(lèi)實(shí)驗用水要求選擇配置殺菌功能，有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，更有可有效去除掉熱源、內毒素的超濾型純水裝置。

 

　　6、冰箱：電熱培養箱備設備，應，不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細胞有害的物質(zhì)，且應保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱。（1）普通冰箱：儲存培養液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養用的物品，可短期保存組織樣本。（2）-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱：用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長(cháng)時(shí)期存放的制劑，如酶、血清等。